Behzat Çimen, Erciyes University, Faculty of Pharmacy, Department of Biochemistry, Kayseri, Turkey Email: behzatcimen@yahoo.com

ABSTRACT

Objective: Determination the expression of P-glycoprotein is especially problematic for normal tissues because immuno­logical methods are limited in terms of sensitivity. We aimed to determine the expression of P-glycoprotein and CD34 by flow cytometry, and to evaluate the level of expression of P-glycoprotein and CD34 with unresponsive to treatment in pa­tients diagnosed with hematologic malignancy.

Methods: Our study included fifty patients diagnosed with acute myeloblastic leukemia and acute lymphoblastic leuke­mia, and twenty healthy controls who were admitted to Erci­yes University Hematology-Oncology Hospital. The suspend­ed cells from bone marrow samples of patients and the pe­ripheral blood samples of healthy people were marked with P-glycoprotein phycoerythrin and CD34 FITC or PerCP Cy 5.5; and then surface expression was measured by means of flow cytometry.

Results: In 6 of 30 acute myeloblastic leukemia patients P-glycoprotein and CD34 expression, in 6 of 20 acute lympho­blastic leukemia patients P-glycoprotein, in 5 of them CD34 expression were determined. A significant relation between P-glycoprotein and CD34 expressions in acute myeloblas­tic leukemia and acute lymphoblastic leukemia bone marrow samples was reported.

Conclusion: Our data indicate that flow cytometry is more reliable, precise and faster than molecular methods for mea­suring P-glycoprotein expression and suggests the pos­sibility of a significant relationship between P-glycoprotein and CD34 expressions in acute myeloblastic leukemia and acute lymphoblastic leukemia bone marrow samples. The blast cells expressing CD34 on their surface along with P-glycoprotein simultaneously show that multi drug resistance 1 gene is mostly active in immature cells.

Key words: MDR-1 gene, AML, ALL, P-glycoprotein, flow cytometry

Hematolojik Malignansilerde P-Glikoprotein Ekspresyonunun Akım Sitometri İle Belirlenmesi

ÖZET

Amaç: Duyarlılık açısından sınırlı olan immünolojik yöntem­ler kullanılarak özellikle normal dokulardaki P-glikoprotein ekpresyonunun belirlenmesi sorun oluşturmaktadır. Bu çalış­mada hematolojik malignansi tanısı almış ve tedaviye yanıt vermeyen hastalarda P-glikoprotein ve CD34 ekpresyonu­nun değerlendirilmesi için, P-glikoprotein and CD34 ekpres­yonunun akım sitometri ile belirlenmesini amaçladık.

Yöntemler: Erciyes Üniversitesi Mehmet-Kemal Dedeman Hematoloji-Onkoloji Hastanesine başvuran akut miyeloblas­tik lösemi ile akut lenfoblastik lösemi tanısı almış 50 hasta ve yirmi kontrol çalışmaya dâhil edildi. Hastaların kemik iliği örnekleri ile kontrol grubundan alınan periferik kan örnekle­rinden elde adilen süspanse hücreler, P-glikoprotein fikoerit­rin ile ve CD34 FITC ya da PerCP Cy 5.5 antikorları ile işa­retlendi ve daha sonra yüzey ekspresyonları akım sitometri ile ölçüldü.

Bulgular: Çalışmamızda 30 akut miyeloblastik lösemi has­tasının 6’sında (%20) P-glikoprotein ve CD34 ekspresyonu tespit edilirken, 20 akut lenfoblastik lösemi hastasının 6’sında (%30) P-glikoprotein, 5’inde (%25) CD34 ekspresyonu tespit edildi. Akut miyeloblastik lösemi ve akut lenfoblastik lösemi kemik iliği örneklerinde P-glikoprotein ve CD34 ekspresyon­ları arasında anlamlı bir ilişki olduğu görüldü.

Sonuç: Bulgular, akım sitometri yöntemi ile P-glikoprotein ekspresyonunun akut miyeloblastik lösemi ve akut lenfob­lastik lösemi kemik iliği örneklerinde moleküler yöntemlerden daha hızlı, güvenilir ve doğru bir şekilde ölçülebildiğini, P-gli­koprotein ile CD34 ekspresyonları arasında anlamlı bir ilişki olabileceğini göstermiştir. Yüzeyinde CD34 eksprese eden blast hücrelerinin aynı zamanda P-glikoprotein eksprese et­meleri hücrelerdeki çoklu ilaç direnci geninin daha çok olgun­laşmamış hücrelerde aktif olduğunu göstermektedir.

Anahtar kelimeler: Çoklu ilaç direnci-1 geni, AML, ALL, P-glikoprotein, akım sitometri

Dicle Med J  2016;43(1):33-38

doi: 10.5798/diclemedj.0921.2016.01.0634